高效液相色譜儀是一種基于色譜技術(shù)的分析儀器，具有高分離能力、高靈敏度和廣泛的應(yīng)用范圍。它在化學(xué)、生物、制藥、環(huán)境和食品等領(lǐng)域中扮演著重要的角色?；谝合嗌V技術(shù)，通過樣品在固定相上的分配和吸附作用來實(shí)現(xiàn)分離。它利用高壓泵將流動(dòng)相（溶劑）推動(dòng)通過色譜柱，樣品溶液通過柱時(shí)，不同成分因?yàn)樵诠潭ㄏ嗌系南嗷プ饔昧Σ煌蛛x出來。通過調(diào)整流動(dòng)相的性質(zhì)和梯度條件，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品的高效分離。
高效液相色譜儀其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
1、高壓輸液系統(tǒng)：
HPLC采用高壓泵來推動(dòng)流動(dòng)相通過色譜柱，以實(shí)現(xiàn)快速、高效的分離。高壓泵的輸出壓力通常在4.7×10^7Pa至4.4×10^7Pa之間，流速可調(diào)且穩(wěn)定。這種高壓輸液方式能夠降低樣品在色譜柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，加快其在柱中的移動(dòng)速度，從而提高分辨率和回收率。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)：
進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量恒定，有助于提高分析樣品的重復(fù)性。進(jìn)樣器應(yīng)具有微量進(jìn)樣功能，且進(jìn)樣操作簡(jiǎn)便、快速。常見的進(jìn)樣方式包括閥進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
3、色譜柱：
色譜柱是HPLC的核心部件，用于分離樣品中的各組分。色譜柱內(nèi)部填充有固定相，不同組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。色譜柱的長度一般為10～50cm，內(nèi)徑為2～5mm，由優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管等材料制成。固定相的粒度通常為5～10μm，具有高柱效但會(huì)引起高阻力。
4、檢測(cè)系統(tǒng)：
檢測(cè)器將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測(cè)量的電信號(hào)，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收并得到樣品分離的色譜圖。常見的檢測(cè)器有紫外-可見光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器等，可根據(jù)不同物質(zhì)的吸收、發(fā)射或電導(dǎo)特性進(jìn)行檢測(cè)。
5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)用于處理記錄儀記錄的信號(hào)，進(jìn)行色譜峰識(shí)別、定量和定性分析等。該系統(tǒng)應(yīng)具有強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理能力和友好的用戶界面。
6、其他輔助系統(tǒng)：
包括流動(dòng)相儲(chǔ)存器、脫氣器、梯度洗脫裝置等。流動(dòng)相儲(chǔ)存器用于儲(chǔ)存流動(dòng)相，通常為高壓密封容器，可確保流動(dòng)相的純度和穩(wěn)定性。脫氣器用于防止流動(dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測(cè)器，從而引起噪聲。梯度洗脫裝置可在分離過程中通過逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力。
